Un pipetage mains-libres pour les dilutions en série dans la détermination de la CMI

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Un pipetage mains-libres pour les dilutions en série dans la détermination de la CMI

La résistance aux antibiotiques est en hausse, avec des conséquences potentiellement désastreuses pour notre bien-être et une charge économique de plus en plus lourde sur nos systèmes de santé, créant un besoin urgent de nouveaux composés antimicrobiens. Dans la découverte de médicaments, la recherche de nouveaux antibiotiques requiert un dépistage à grande échelle de médicaments candidats, nouveaux ou modifiés, pour évaluer leur activité et leur puissance. Dans cette phase précoce du processus de découverte, la plupart des chercheurs tentent généralement d'identifier un ou plusieurs des critères suivants :

  • CMI – Concentration minimale inhibitrice, concentration minimale d’antimicrobiens inhibant la croissance d'un micro-organisme.
  • CI50 – Concentration inhibitrice 50%, mesure de la puissance d’un composé dans un essai inhibiteur d’activité biologique ou de dépistage biochimique.
  • CE50 – Concentration effective 50%, concentration d’un composé induisant une réponse à mi-chemin entre valeur initiale et réponse maximale.
  • DL50 – Dose létale médiane, dose requise pour causer la mort de la moitié de la population d’un échantillon test.

La détermination de ces paramètres nécessite de multiples dilutions et plusieurs réplicas de chaque candidat composé, ce qui exige un pipetage et un mélange précis pour garantir des résultats fiables et reproductibles. La détermination de la CMI est souvent la première étape du processus. Nous allons donc nous concentrer sur cet exemple pour vous montrer comment l’automatisation du pipetage peut augmenter la reproductibilité et la productivité de vos processus.

Comment détermine-t-on la CMI ?

Une approche courante pour déterminer la CMI consiste à utiliser une méthode de micro-titrage standard – en effectuant une double dilution sérielle du candidat composé dans un milieu de croissance liquide dans une microplaque, puis en inoculant chaque puits avec une quantité prédéfinie de bactéries. Les microplaques peuvent ensuite être incubées et évaluées en termes de croissance bactérienne en utilisant un lecteur de microplaque afin d'identifier la concentration efficace la plus basse du composé. Cette approche peut être utilisée pour tester des milliers de composés, mais c’est un processus fastidieux, chronophage et source d'erreurs et de contaminations lorsqu’on le réalise manuellement.

Test CMI dans une plaque 96 puits

Simplifier les dilutions en série

Chez INTEGRA, nous œuvrons à trouver des solutions plus simples pour les tâches de pipetage courantes et répétitives telles que les dilutions en série. Nos pipettes électroniques multicanaux et nos robots de pipetage de haute qualité peuvent résoudre de nombreux problèmes liés au pipetage manuel, offrant une performance, une précision et une reproductibilité accrues pour maximiser la productivité. Par exemple, combiner le robot de pipetage ASSIST PLUS et une pipette à écartement réglable des pointes VOYAGER constitue une solution mains-libres pratique pour effectuer des dilutions en série de plusieurs échantillons simultanément.

Cette configuration permet d'automatiser les étapes de transfert et de mélange, en les exécutant de façon plus rapide et plus fiable qu’un technicien travaillant sur sa paillasse. Les hauteurs et les vitesses de pipetage ainsi que les paramètres de mélange sont cohérents pour toutes les dilutions – pour une reproductibilité garantie – tout en supprimant les risques ergonomiques liés au pipetage manuel.

ASSIST PLUS pipetting robot

Point crucial : l’écartement automatique des pointes de VOYAGER permet le transfert rapide des composés ou de l'inoculum directement des tubes aux microplaques, éliminant ainsi la contrainte chronophage du pipetage monocanal. Cette approche mains-libres aide les laboratoires à atteindre leur pleine capacité de test et à accélérer les processus de développement des médicaments. Découvrez ici comment ASSIST PLUS aide les scientifiques du Southmead Hospital de Bristol, au Royaume-Uni, dans leurs travaux quotidiens de détermination de la CMI.

Traiter plus vite un plus grand nombre d’échantillons

INTEGRA propose également de nombreuses solutions de pipetage de paillasse pour vous permettre le remplissage simultané de tous les puits d’une plaque 96 ou 384 puits. Ces options augmentent considérablement le débit du remplissage de plaques et permettent même de faire des dilutions sérielles en ne chargeant qu’une seule rangée ou colonne de pointes. Le pipetage de plaques entières aide à éliminer la variabilité liée au temps dans les essais cellulaires, en permettant l’inoculation simultanée de tous les puits pour accélérer la préparation du test. Découvrez comment Evotec, à Lyon, en France, a optimisé son débit d’échantillons grâce au VIAFLO 96.

Robot de pipetage ASSIST PLUS transfère des échantillons de tubes à une plaque 96 puits

Préserver la stérilité

Le faible encombrement de nos systèmes de pipetage automatisé fait qu'ils sont idéaux pour une utilisation sous hotte à flux laminaire. Combinée avec nos pointes GripTip – conçues pour être parfaitement alignées et ne jamais fuir ni tomber - cette configuration contribue à réduire le risque de contamination et donc, potentiellement, à éviter des heures de travail perdu.

Utilisation facile

Les systèmes de pipetage électronique d’INTEGRA se contrôlent via une interface commune à molette tactile, ce qui permet de passer facilement d’un appareil à l’autre. Cette configuration intuitive permet une navigation et des opérations simples et propose des programmes prédéfinis et personnalisables de préparation et de conduite de tests de CMI. Il suffit aux opérateurs de saisir les volumes, les formats de récipients, les paramètres de mélange et les contrôles souhaités pour créer un processus de test complet qui améliore la productivité globale du laboratoire.

VIAFLO 96/384 performing a serial dilution