移液器例行检查
[最佳操作]

Poster on how to calculate the accuracy and precision of a pipette

您的移液器在年度校准之间的性能如何？

遵循以下最佳操作指南进行例行检查并了解：

  • 需要准备什么
  • 如何进行测量
  • 如何分析数据

如果需要，您也可以下载指南海报

为什么要例行检查？

移液器应每年校准以保持其性能。在此期间，建议进行例行检查以测试其功能，为您的移液结果提供充分的可信度。请遵循以下指南正确执行此类例行检查。

注意：您可以在INTEGRA电动移液器上按日期或周期设置校准提醒。

1 环境和材料

环境

无风，温度恒定，15℃至30℃之间，测量期间最大偏差±0.5℃.

thermometer

材料

天平

配备防风罩和防蒸发阱。
防蒸发阱替代装置：将4个装满水的容器分别置于防风罩内的四角。

所需的数字显示位数取决于移液器的标称容量。

正常移液量 数字（可读）
0.5 µl ≤ V < 20 µl  单通道天平： 6 (0.001 mg)
多通道天平： 5 (0.01 mg)
20 µl ≤ V < 200 µl 5 (0.01 mg)
200 µl ≤ V ≤ 10 ml 4 (0.1 mg)
balance

称重容器

最好使用金属容器以减少静电的累积。
替代：1.5 ml微量离心管。

测试液体

蒸馏水

移液器枪头

使用移液器制造商推荐的枪头以获得最佳效果。

注意：INTEGRA GRIPTIPS® 枪头能够紧扣移液 器，永不松动、渗 漏或脱落。

How GripTip pipette tips attach to the pipette

2 开始之前

开始测试前2小时，将移液器、枪头和测试液体置于实验室内使其达到室温。

记录日期、环境温度和气压。如果没有气压计，可在互联网上搜索本地气象站发布的当地气压。

使用正确的移液技巧至关重要。

watch and checklist

3 渗漏测试

在进行称重测试之前，请测试移液器是否渗漏。

  1. 执行3次标称体积的吸取和分液以预润湿枪头。
  2. 使用同一枪头吸取标称体积。
  3. 将移液枪头浸入液体内2mm深，垂直握住移液器30 秒，然后将吸头浸没在液体中，从吸头中分配所有剩余 的液体
  4. 如果液位没有下降并且没有气泡产生，继续验证。如 液位减少，则表明有漏液。请联系制造商讨论进一步的 步骤。请联系制造商讨论进一步措施。
Pre-wet your pipette tips to ensure highest pipette precision

4 称重测试

称量容器不应干燥。加入少量蒸馏水。

测量次数

以标称体积的100％和10％分别进行至少4次测量。从100％开始。

多通道移液器需验证首个通道和一个中间通道。

流程

  1. 将称量容器放入天平，读数稳定后去皮。
  2. 装载一支新枪头。
  3. 进行预润湿（请参阅第3节）。
  4. 向称量容器分液。 确保沿容器内壁分液，结束时将枪头末端沿容器 内壁向上滑动以排出残留的液体。
  5. 读取重量记入表格。
  6. 使用同一支枪头，重复步骤4-5至少4次。 每次读数后都需要去皮。
  7. 弹出枪头并装载一支新枪头。
  8. 重复步骤1-7，进行第二个测试体积的称量。
Validate the first and middle channel of a multichannel pipette to determine pipette accuracy and precision

5 数据分析

1. 使用Z因子将每次测量的天平读数（mg）转换为体积（µl）。对应关系表可在INTEGRA网站的下载专区下载。

pipetting poster formulaVi = 单个体积 µl
mi = 单个重量 mg
Z = Z 因子


以下是如何转换100µl单通道移液器的平衡读数的示例：

测试体积：100µl
温度：21.5 °C
大气压：101.3 kPa

检测# 重量（MG）
1 100.08
2 100.10
3 100.11
4 100.22
5 100.15

Vi = 100.08 mg x 1.0032 → Vi = 100.40 µl
Vi = 100.10 mg x 1.0032 → Vi = 100.42 µl
Vi = 100.11 mg x 1.0032 → Vi = 100.43 µl
Vi = 100.22 mg x 1.0032 → Vi = 100.54 µl
Vi = 100.15 mg x 1.0032 → Vi = 100.47 µl

2. 使用计算的Vi测量值计算每个测试体积和每个通道的平均体积：

pipetting poster formula 2V = 平均体积
n = 称量次数


检测# 使用与上述相同的示例，平均体积为100.45µl：

V = (100.40 µl + 100.42 µl + 100.43 µl + 100.54 µl + 100.47 µl) / 5 → V = 100.45 µl

3. 计算每个测试体积和每个通道的准确度（系统误差），单位为%：

pipetting poster formula 3es = 系统误差 %
Vs = 所选测试体积


使用上面计算的平均体积，其计算精度为0.45%：

es = (100 (100.45 – 100)) / 100 → es = 0.45 %

4. 计算每个测试体积和每个通道的精度（随机误差），单位为%：

pipetting poster formula 4sr = 重复性标准偏差 

pipetting poster formula 4CV = 变异系数 %


使用上述示例计算中的数值，得出精度为0.05%：

sr = √(((100.40 – 100.45)2 + (100.42 – 100.45)2 + (100.43 – 100.45)2 + (100.54 – 100.45)2 + (100.47 – 100.45)2) / (5 – 1)) → sr = 0.05

CV = 100 (0.05 / 100.45) → CV = 0.05 %

将计算得出的准确度和精密度与制造商的性能参数进行比较。如果计算值不在参数范围内，则需要校准移液器。如果移液器通过例行检查，则说明其已按预期运行演示。

注意：INTEGRA电动移液器可轻松校准。只需输入目标体积和您测得的实际体积，然后单击校准即可。

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总结

  • 例行检查应在无风、恒温（15 °C 到 30 °C之间）的环境中进行
  • 准备一台配备防风罩和防蒸发阱的天平，一个金属称重容器，蒸馏水以及枪头
  • 开始测量前2小时，将移液器、枪头和蒸馏水置于测试房间内
  • 记录日期、环境温度和气压
  • 检查移液器是否渗漏
  • 以标称体积的100％和10％分别进行至少4次重量测量
  • 计算准确度和精密度，并与制造商的性能参数进行比较