1. Umgebung und Materialien

Umgebung

Zugfreiheit, konstante Temperatur zwischen 15 °C und 30 °C, max. Abweichung zwischen den Messungen ±0,5 °C.

Materialien

Waage

Mit Abschirmung gegen Luftzug sowie mit einer Verdunstungsfalle.
Alternativlösung: 4 mit Wasser gefüllte Behälter in jeder Ecke der Zugabschirmung.

Die Anzahl der erforderlichen Stellen hängt vom Nennvolumen Ihrer Pipette ab.

Nennvolumen	Stellen (Lesbarkeit)
0.5 µl ≤ V < 20 µl	Einkanal-Waage: 6 (0.001 mg) Mehrkanal-Waage: 5 (0.01 mg)
20 µl ≤ V < 200 µl	5 (0.01 mg)
200 µl ≤ V ≤ 10 ml	4 (0.1 mg)

Wägebehälter

Verwenden Sie bevorzugt einen Metallbehälter, um statische Aufladungen zu vermeiden.
Alternativlösung: 1,5 ml Mikrozentrifugenröhrchen.

Testflüssigkeit

Destilliertes Wasser

Pipettenspitzen

Optimale Ergebnisse erzielen Sie mit den vom Hersteller empfohlenen Pipettenspitzen.

Hinweis: Die GRIPTIPS^®-Pipettenspitzen von INTEGRA rasten ein, werden nicht locker, nicht undicht und fallen nicht ab.

2. Bevor Sie beginnen

Bringen Sie die Pipette, die Spitzen und die Testflüssigkeit 2 Stunden vor Beginn der Messungen in den Testraum, damit sich diese an die Raumtemperatur angleichen.

Notieren Sie Datum, Raumtemperatur und Luftdruck. In Ermangelung eines Barometers notieren Sie die Luftdruckangabe einer lokalen Wetterstation aus dem Internet.

Eine korrekte Pipettiertechnik ist entscheidend.

3. Dichtheitsprüfung

Bevor Sie gravimetrische Messungen durchführen, müssen Sie die Pipette auf Dichtheit prüfen:

1. Befeuchten Sie die Spitze(n) durch dreimaliges Aufnehmen und Abgeben des Nennvolumens.
2. Nehmen Sie das Nennvolumen mit der/denselben Spitze(n) auf.
3. Halten Sie die Pipette 30 Sekunden senkrecht, während die Spitze/die Spitzen in 2 mm Flüssigkeit getaucht sind. Dispensieren Sie anschließend mit der/den in Flüssigkeit getauchten Spitze/Spitzen alle verbleibende Flüssigkeit aus der Spitze/den Spitzen.
4. Wenn der Flüssigkeitsstand nicht sinkt und keine Luftblasen vorhanden sind, fahren Sie mit der Validierung fort. Ein sinkender Flüssigkeitsstand weist auf ein Leck hin. Wenden Sie sich an den Hersteller,um die nächsten Schritte zu erfragen.

4. Gravimetrische Messung

Der Wägebehälter darf nicht trocken sein. Füllen Sie etwas destilliertes Wasser hinein.

Anzahl Messungen

Führen Sie mindestens 4 Messungen bei jeweils 100 % und 10 % des Nennvolumens durch. Beginnen Sie mit 100 %.

Überprüfen Sie bei Mehrkanal-Pipetten den ersten sowie einen mittleren Kanal.

Vorgehen für gravimetrische Messung

1. Tarieren Sie die Waage mit dem Wägebehälter.
2. Laden Sie eine neue Pipettenspitze.
3. Befeuchten Sie die Spitze (siehe Schritt 3).
4. Dispensieren Sie Flüssigkeit in den Wägebehälter. Dispensieren Sie immer entlang der Gefässwand und streifen Sie das Spitzenende zum Abschluss an der Wand ab, um Restflüssigkeit zu entfernen.
5. Notieren Sie das Gewicht in einer Tabelle.
6. Wiederholen Sie die Schritte 4 bis 5 mindestens 4-mal mit derselben Spitze. Tarieren Sie die Waage nach jeder Ablesung.
7. Werfen Sie die Spitze ab und laden Sie eine neue.
8. Wiederholen Sie die Schritte 1 bis 7 mit dem zweiten Testvolumen.
    

5. Datenanalyse

Schritt 1: Konvertieren Sie die Wägewerte für die Messungen (mg) mittels des Z-Faktors in Volumen (µl) um (Tabelle für die Bestimmung des Z-Faktors):

V_i = Einzelvolumen in µl
m_i = Einzelwägung in mg
Z = Z-Faktor

Hier ist ein Beispiel für die Umrechnung der Wägewerte für eine 100-µl-Einkanalpipette: Testvolumen: 100 µl Temperatur: 21,5 °C Luftdruck: 101,3 kPa  Nr. der Messung Gewicht (mg) 1 100,08 2 100,10 3 100,11 4 100,22 5 100,15 Vi = 100,08 mg x 1,0032 → Vi = 100,40 µl Vi = 100,10 mg x 1,0032 → Vi = 100,42 µl Vi = 100,11 mg x 1,0032 → Vi = 100,43 µl Vi = 100,22 mg x 1,0032 → Vi = 100,54 µl Vi = 100,15 mg x 1,0032 → Vi = 100,47 µl

Schritt 2: Berechnen Sie das mittlere Volumen pro Prüfvolumen und Kanal anhand der berechneten V_i Messungen:

V = Mittleres Volumen
n = Anzahl der Wägungen

Wenn wir die Zahlen aus oben genanntem Beispiel verwenden, ergibt sich ein mittleres Volumen von 100,45 µl: V = (100,40 µl + 100,42 µl + 100,43 µl + 100,54 µl + 100,47 µl) / 5 → V = 100,45 µl

Schritt 3: Berechnen Sie die Genauigkeit (systematische Abweichung) in % pro Prüfvolumen und pro Kanal:

e_s = Systematische Messabweichung in %
V_s = Ausgewähltes Testvolumen

Wenn wir das oben berechnete mittlere Volumen verwenden, ergibt sich eine Genauigkeit von 0,45 %: es = (100 (100,45 – 100)) / 100 → es = 0,45 %

Schritt 4: Berechnen Sie die Präzision (zufällige Abweichung) in % pro Prüfvolumen und pro Kanal:

s_r = Wiederholbarkeits-Standardabweichung

CV = Variationskoeffizient in %

Wenn wir die Werte aus den oben berechneten Beispielen verwenden, ergibt sich eine Präzision von 0,05 %: sr = √(((100,40 – 100,45)2 + (100,42 – 100,45)2 + (100,43 – 100,45)2 + (100,54 – 100,45)2 + (100,47 – 100,45)2) / (5 – 1)) → sr = 0,05 CV = 100 (0,05 / 100,45) → CV = 0,05 %

Vergleichen Sie die berechnete Genauigkeit und Präzision mit den Spezifikationen des Herstellers. Wenn die berechneten Werte ausserhalb der Spezifikationen liegen, muss die Pipette kalibriert werden. Wenn die Pipette die Routinekontrolle besteht, funktioniert sie wie vorgesehen.

Hinweis: Die elektronischen Pipetten von INTEGRA können einfach kalibriert werden. Geben Sie nur ein Zielvolumen und das tatsächlich gemessene Volumen ein und klicken Sie anschliessend auf Kalibrieren.
 

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