How to use serological pipets
如何使用血清移液管和电动助吸器
使用血清移液管来进行体积称量是实验室的日常工作之一。尽管其非常简单,但在操作中仍然可以遵循一些最佳实践来确保液体称量的准度和精度,并且最好使用PIPETBOY GENIUS这样的电动助吸器。

从基础开始
准度和精度
什么是准度和精度?准度是指分配出的体积与指定值的接近程度,由仪器和耗材的设计和品质决定。而精度则是一种衡量可重复性的指标,即多次移取指定体积的等份并获得相同结果的能力,该指标很大程度上取决于是否遵循了最佳的移液实践。
血清移液管是用于准确转移毫升级液体的体积称量工具。它们通常是以去离子水进行量出校准(TD,Ex)的,在20℃下准度为±2%。即使液体处理操作得再完美,也无法进一步优化该参数。由于吸取的体积会略多于分配出的体积,因此这些重要的实验室工具在校准时就包含了液体转移后残留在移液管中的润湿剩余物。吹出是必不可少的,旨在确保所有液体都被移出。某些液体会在吹出操作之后汇聚到尖端,但这些并不属于分液体积。更重要的是应该认识到,由于校准/参考温度是20 °C,因此任何偏离该温度的情况都需要进行校正,以保持移液的准度和精度。当温度不等于20 °C时,使用者必须吸入比移液管刻度略多或略少的液体,来抵消分配量的不足或过多。
遵循最佳操作实践
温度
在移液之前,预留充足的时间让液体平衡到环境温度,并且考虑到温度对空气和液体膨胀的影响是非常重要的。被移取液体的温度会影响空气的膨胀,吸头中的空气越多,其影响也就越大。
在室温下移取未经平衡的热或冷的液体会使血清移液管中的空气不同程度地膨胀。理想情况下,移液管、电动助吸器和液体都应平衡到相同的温度。这样可以避免移液管和液体之间存在显著的温度差。通过重复2到3次的液体吸取和分配来预润湿移液管有助于平衡移液管的内部环境,从而缩小误差的范围。
液体密度
液体的吸取也会受到其体积质量密度,也就是液体密度(质量-体积比)的影响。血清移液管是使用去离子水校准的,但其也会被用于移取密度不同的液体。例如,它们可能被用于吸取和分配密度低于或高于水的非水流体。因此,在操作过程中可能需要吸取更多或更少的液体来抵消密度的差异。实际分配所得的体积可以使用实验室天平进行称重验证,以确保准确度。
非水液体
移液的技巧需要根据液体的特性(例如黏度和挥发性)来灵活调整以确保处理得当。例如,挥发性液体蒸发快,吸取和分配都要尽可能快地完成,预润湿步骤也是有益的。而对于黏性液体来说,情况则完全相反,缓慢地吸取和分配,并且留出足够的时间以确保所需体积的完全吸取和分配是非常重要的。
海拔高度
不同地理高度处的气压不同。如果使用移液管的位置与其校准地点之间存在显著的高度差,就可能会影响结果。吸取少量确定体积的水,并在天平上称重即可检验是否存在偏差,然后根据需要调整待分配的体积。
正确选择移液管量程
由于空气会随温度的上升而膨胀,所以空腔体积对于移液准确度的影响很大。分液体积越小,这一点就越为重要。尽可能选用量程更小的移液管以减少空腔体积。例如,需要分配8 ml液体时,应使用10 ml移液管(甚至有扩展量程的5 ml移液管)。血清移液管仅能精确到其最小增量,该值会标注在移液管上端,这也是您能分配出的最小体积。1 ml 1/100表示最小增量为0.01 ml。
读取液体弯月面
弯月面描述的是液体表面的弯曲,可能朝上,也可能朝下。它是由液体的粘附力和内聚力以及血清移液管的内径相互作用所产生的。通常来说,正确的体积是通过读取凹液面来确定的,也就是说在分液至指定刻度线之前,实际吸取的液体会略多于所需的体积。移液管必须保持竖直且与视线处于同一水平面,使刻度环重合为一条线,读取弯月面最低点接触刻度线上边缘处的体积值。在浅色背景前,弯月面会更暗,更容易读取。
电动助吸器的使用提示和技巧
移液前,必须正确设置电动助吸器,细节如下。
对于1和2 ml移液管
- 将移液速度预先设置为最低,以防满溢。
- 因电动助吸器而异,转动无菌模块(喷嘴配件)中的硅胶夹具,以确保移液管的牢靠固定。
对于5-100 ml移液管
- 将移液速度预先设置为最大,或根据您的移液量和样品选择最适合的速度。
- 使用25-100 ml移液管时,应尽可能选用具有防滴漏设计的移液管以降低漏液的风险。
注意:使用INTEGRA的PIPETBOY电动助吸器时,可以通过调节按压电动助吸器按钮的力度大小来控制吸取和分配的速度,直至达到指定的速度。除此之外,使用拇指滚轮可以预先设置最大速度。
对于所有血清移液管
为了尽可能长久地保持无菌,应从移液管上端一侧拆开包装,然后将其安装在电动助液器上。将管头浸入液体中,进行全量程吸取和分配,重复2到3次以预润湿移液管。吸取略多于所需体积的液体,然后擦拭移液管外部,去除所有残留的液体。保持移液管与视线齐平,分配并丢弃废液,直到弯月面底部到达正确的刻度。将管头紧靠目标容器内壁,分配出所有剩余的液体,然后吹出少量空气以确保液体被全部移出。
注意:INTEGRA PIPETBOY可逐滴分配,能够在处理敏感细胞或黏性液体时实现高度可控的液体分配和更低的剪切力。
使用电动助吸器进行重复分液
在各种不同的应用中,先吸取大量的液体然后分配出多个较小等份的功能往往都是很有帮助的。传统的电动助吸器需要基于移液管上的刻度线,依靠视觉控制来分配所需的等份。取而代之,您可以选用带有重复分配模式的电动助吸器。INTEGRA的PIPETBOY GENIUS可一键分配出多个用户指定体积的相同等份,无需目视观察。*
*仅在配合使用INTEGRA血清移液管时可用。
维护电动助吸器以避免污染
使用浸有肥皂水或70%酒精的布定期清洁电动助吸器,如果无菌模块中的移液管夹具和滤芯橡胶已损坏,需及时更换。无菌模块通常可以高压灭菌。疏水滤芯可防止过量液体进入设备,应每三个月更换一次,如果已经因移液管满溢而被污染,则应立即更换。INTEGRA的PIPETBOY GENIUS具有防满溢功能,可降低因意外触碰到所移取的液体而造成滤芯必须更换的风险。
注意:INTEGRA PIPETBOY可使用0.2和0.45 µm的无菌和非无菌滤芯。建议在诸如细胞培养等精细应用中使用0.2 µm的无菌滤芯。
总结
为了确保血清学移液的准度和精度,遵循以上列出的最佳操作实践是非常重要的,使用电动助吸器将帮助您更好地控制液位。但是,即使遵循了最佳实践,也不可能突破血清移液管的校准精度。血清移液管最好配合电动助吸器使用,这样就能更舒适地吸取和分配各种体积的液体。INTEGRA血清移液管的量程覆盖了1-100 ml,每一支的刻度都经过校准,可精准读取液体体积。借助鲜明的颜色标识,一眼就能快速辨别移液管量程。较大量程的移液管**还采用了防滴漏设计,旨在通过降低转移过程中液体从移液管中滴落的风险来提高准确度和可重复性。INTEGRA的PIPETBOY电动助吸器能够更好地发挥这些优势,为您细致入微的血清学移液提供一切所需。
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注意:目标体积更小时,推荐使用微量移液器。阅读如何使用微量移液器,了解更多信息。
**25、50和100 ml