专家建议:MTT分析试剂分液指南

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专家建议:MTT分析试剂分液指南

Gerald Posch 是 INTEGRA Biosciences 的生物技术专家兼产品经理,专注于优化那些足以影响实验成功与否,但却经常被忽视的重要细节。Gerald在维也纳自然资源与生命科学大学获得了硕士学位和博士学位,在此期间,他从事过酶动力学探究和细菌细胞表面特性表征,还进行过细菌糖基化的相关研究,即在蛋白质上连接糖基从而影响蛋白质动力学的细微的翻译后修饰过程。在阿尔伯塔大学的博士后研究以及在生物制药行业的5年中,Gerald将其在糖基化工程领域的专业知识运用到了疫苗研发中,此后便加入了INTEGRA。凭借着Gerald对细节的洞察以及与新药发现前沿科学家的对话,Gerald和INTEGRA团队开发出了一种创新的解决方案——WELLJET 试剂分液器,来帮助化解MTT等常见分析中繁琐的试剂分配痛点。

Gerald Posch

试剂分液器如何优化MTT分析数据?

MTT分析中不同溶液和细胞的分配都需要高度的一致,但如果仅使用简单的移液设备手动构建该体系却往往无法达到这样的效果。自动化的分液解决方案有助于提高数据的可重复性和一致性。WELLJET采用了蠕动泵系统,借助分液器泵组件内的转子推动液体前移。不同于其他试剂分液器的是,WELLJET使用了由注塑硅胶制成的EasySnap™分液盒,可确保盒内所有管路的尺寸相同。EasySnap分液盒设计与蠕动泵的结合,可使各通道的试剂分配更具一致性,这意味着研究人员可以确信,注入其多孔板中每一个孔的体积都相同且正确。这将消除孔与孔之间的差异,并为实验的准确性提供保障。硅胶管路内的液体不会与仪器或泵部件相互作用,可保持实验的无菌。WELLJET可兼容各种不同的源容器,从试剂瓶到烧瓶,甚至试管,都能从中吸取液体,并将其分配到6孔至1536孔之间各种规格的多孔板中。这使得研究人员能够定制自己的试剂分液器,来满足不同实验和实验步骤的独特需求。

细胞活性的改变将影响MTT分析的结果。试剂分液器如何帮助优化细胞活性?

该设备的主要优点之一是操作非常温和。通过硅胶管路来泵送细胞的剪切力很低,非常适合用于脆弱易损的细胞系。我们提供了 2 种型号的分液盒:大口径分液盒和小口径分液盒。大口径分液盒的硅胶管路内径更大,分液嘴口径也更大。对于此前一直使用移液器,还未体验过试剂分液器的用户来说,如果想要开始分配细胞,那么我们的首要建议是使用孔口更大的大口径分液盒,以保证被试细胞的“心情愉悦”,尤其是在不清楚该细胞的敏感性和脆弱性的情况下。但在我们的客户数据中,也有使用小口径分液盒并以较高的分液速度成功处理了脆弱细胞系的案例。

在分配细胞时,研究者们还需要注意哪些因素?

具体问题的排错和修正很大程度上取决于要处理的细胞类型。一般来说,分配速度是很重要的。我们的WELLJET提供了3种不同的速度设置:快速、中速和慢速。我们已经看到了快速设置下的优异结果案例。如果发现细胞的存活率不理想,则应使用更慢的速度进一步优化。此外,在其他众多因素中,分液模块距离孔板的高度也会产生明显的影响。找到合适的高度设置或者降低分配高度可能有助于研究人员在操作脆弱细胞时获得更好的结果。

为了尽可能地延长分液盒的使用寿命,研究者们应该如何维护?

分液盒是重复使用的。就可分配的孔板数量而言,其标准寿命为2000个100微升的96孔板。超过此数量则建议更换分液盒。INTEGRA可提供无菌分液盒,但为了保持其最佳状态,每次分液活动后都应正确地清洁分液盒,这一点非常重要。其所分配的细胞溶液、缓冲液或化合物中含有细胞、蛋白质和盐,这些都可能堵塞分液盒,尤其是在分液嘴处。我们建议科学家们使用去离子水和温和的洗涤剂彻底洗去细胞溶液,再用水洗去洗涤剂,以避免管路或分液盒中残留的清洁成分影响下一次的细胞分配活动。清洁后,建议使用消毒剂冲洗分液盒。科学家们可以根据这些步骤设置一套清洁程序,但在执行时需要手动将管路移入不同的源容器。所以这并不是一个完全自动化的过程,但我们希望通过允许客户设定分液盒清洁程序的方式来为客户提供指导。除此之外,分液盒也可以通过高压灭菌来确保无菌。
 

The EasySnap dispensing cassette with features

如何在自动化工作流程中应用试剂分液?

分液过程是自动化的,配合分液叠板机,科学家们可以批量处理一整摞孔板的细胞或试剂分液。从这方面来讲,这些仪器是作为独立单元使用的。但是,WELLJET也可以通过应用程序编程接口(API)命令来整合到自动化工作流程中。我们将提供仪器和API命令以实现集成公司与我们系统的通信。这将触发指令,从而使仪器能够融入全自动系统。有些集成公司可以将不同供应商的仪器整合起来协同工作。以一套完全基于细胞的分析流程为例,WELLJET仅负责分配细胞或试剂,但科学家可能还希望在试剂分配操作之间进行光学读数或孵育步骤。借助集成公司所提供的机械臂和主控软件,就能满足这些需求。机械臂可将多孔板从一台仪器转移到另一台仪器,并启动仪器的处理过程。最终,您将能够实现整个分析流程或者药物化合物筛选平台的自动化。

研究者们还可以在哪些应用中使用试剂分液器?

几乎所有的分析都会涉及到某些试剂的分配或者液体处理,因此,它们也都能受益于试剂分液器。WELLJET可处理符合ANSI/SLAS规格的孔板,这是基于孔板尺寸和不同的微孔布局而制定的标准多孔板规格。科学家们可以从单个孔板开始,然后逐渐增加孔板数量。如果需要更高的通量,可以换用叠板机版本。两款仪器的占地面积都非常小,可以放入生物安全柜使用。
 

Compact, affordable, fast, and precise. The WELLJET dispenser (left) and dispenser stacker (right) will revolutionize your workflow of dispensing reagents into microwell plates.

WELLJET试剂分液器最具创新性的特点是什么?

对我来说,最具创新性的特点是EasySnap分液盒,它采用了模塑成型的硅胶管路,无需重新校准,从而降低了客户的成本并且能够确保所有通道的高度精准。此外,易于操作的大屏交互界面与非常顺滑且精确的机械构造,使WELLJET从众多的试剂分液器中脱颖而出。我们竭尽全力将更多的技术纳入到了非常紧凑的仪器中。在不折损功能性的前提下尽可能地缩小仪器的尺寸始终是一项不小的挑战。我们广泛地与科学家们沟通交谈,旨在了解他们现有解决方案的痛点,以及我们应该如何通过新的解决方案改善这些问题。我们的目标不仅仅是生产另一种产品,而是希望确保我们开发的产品也处在创新的前沿。最后,与客户交流并且了解到这些仪器是如何帮助他们优化了效率、数据生成、可靠性以及一致性是非常振奋人心的。

如果您想获取更多相关信息,请下载我们的技术指南,了解如何将试剂分液技术应用于MTT分析:

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Drug Discovery News合作撰写

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