移取非水溶液的理想方法

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移取非水溶液的理想方法

适用于所有移液任务的常规建议:

  • 在所有移液步骤中都尽可能保持微量移液器竖直。
  • 移液枪头浸入样品储液槽液面不宜过深,减少样品残留风险。
  • 根据目标液体选择合适的移液速度。

如需了解更多关于最佳移液操作规范的细节,请在这里查看总览

Poster with pipetting tips on how to use a pipette

移取常见非水相液体

所以,我们能做什么呢?在只需要移取一种非水溶液的情况下,可以使用该溶液对移液器进行校准以优化结果。但是,操作者的经验与技巧(包括其对手动移液速度的主观感受)也会显著影响这些液体的移取,而这些往往是被忽视的因素。

在INTEGRA,我们的移液器已经针对最常见的非水溶液进行了测试。以下您将看到各种液体移取挑战性的解释说明,应该如何处理的最佳操作建议以及我们的电动移液器的最佳设置。遵循这些建议可以让您更快地设置微量移液器,以更少的测试获得最佳的结果(尽管对于具体的工作流程可能需要进一步的优化)。

VIAFLO Electronic Pipette Family

如何移取粘性液体

DMSO

二甲基亚砜(DMSO)通常被用作细胞培养中的低温保护剂,或用于在PCR过程中防止DNA模板或引物中二级结构的形成。以下建议可以提高使用VIAFLO移液器处理粘性DMSO时的移液精度:

 

  • 使用低残留枪头 – 因为粘性液体容易附着在枪头壁上,使液体难以全部排出
  • 使用反向移液 – 因为移取粘性液体时很难彻底排空枪头。吸取超过所需体积的液体,分配出所需的量,舍弃剩余液体。
  • 将枪头在溶液中停留更久 – 在吸取和分液之后停留2-3秒,因为移液枪头的小孔径和气柱的弹性可能会使粘性样品无法完整移取
  • 调节速度 – 对于较高浓度的DMSO,请使用450 µl/sec左右(50-1250 μl VIAFLO电动移液器上的速度6)或更低的移液速度。较低浓度的DMSO可使用更高的移液速度
How to pipette viscous liquids: DMSO in a pipette tip

丙三醇

丙三醇是细胞培养中常用的低温保护剂,也是微生物补料分批发酵中的常用碳源。以下建议可以改善使用VIAFLO移液器处理粘性丙三醇时的移液体验:

 

  • 使用大孔径枪头 – 特别是对于80%的丙三醇,因为这些枪头能让液体更顺畅的流入
  • 使用反向移液 – 因为液体附着在枪头壁上,使用常规移液方法难以彻底排空枪头
  • 将枪头在溶液中停留更久 – 在吸取和分液之后停留2-3秒,因为移液枪头的小孔径和气柱的弹性可能会使粘性样品无法完整移取
  • 调节速度 – 请使用300 µl/sec左右的移液速度(50-1250 μl VIAFLO电动移液器上的速度4)。较低浓度的丙三醇粘性更低,可使用更高的移液速度
Glycerol

Tween 20

Tween 20是常用的免疫分析洗涤剂,因为它能阻止非特异性抗体结合。以下建议可以优化使用VIAFLO移液器处理粘性且易起泡沫的Tween 20时的移液结果:

 

  • 使用大孔径枪头 - 因为这些枪头能让液体更顺畅的流入
  • 使用反向移液 – 降低分液时将空气吹入样品的风险,避免产生更多的气泡
  • 调节速度 - 请使用100 µl/sec左右的移液速度(50-1250 μl VIAFLO电动移液器上的速度2)
Pipetting Tween 20

如何移取挥发性液体

乙醇

乙醇的应用范围非常广泛,包括用于微生物的固定、作为碳源以及作为消毒剂、溶剂或DNA和RNA的沉淀剂。以下建议可以提高使用VIAFLO移液器处理挥发性乙醇时的移液精度:

 

  • 使用乙醇预润湿枪头 – 执行2-3次全量程的吸取/分液。这样可以保证移液枪头的内部环境处于乙醇蒸汽饱和状态,可降低目标液体的蒸发。VIAFLO移液器的“移液/混合”模式非常适合执行该操作,您可以将其设置成自定义程序的首个移液步骤。
  • 使用反向移液 – 进一步降低蒸发的影响,因为所有的损失都将体现在分液后舍弃的多余部分,而非所需的分液量中。
  • 调节速度 – 使用~1100 µl/sec(50-1250 μl VIAFLO电动移液器上的速度调至10)的移液速度进行吸取,并使用~343 µl/sec(50-1250 μl VIAFLO电动移液器上的速度调至5)的移液速度进行分液。此速度足以让吸附在枪头内壁上的乙醇薄膜流下并分配至目标容器。较低浓度的乙醇溶液挥发性较弱,可使用更低的移液速度。
How to pipette volatile liquids: Pipette tip with ethanol inside

总结

粘性和挥发性液体的移取可能面临很多问题。深入地了解样品才能优化移液设置以满足每种液体的需要,保证最高的精度和结果的可重复性。以上4个例子旨在为您提供适用于一系列非水溶液的最佳设置思路,可以调整并应用于其他具有相似特性的液体,或者不同量程范围的移液器。

Liquid handling: Multichannel pipette with sterile filter pipette tips