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提升3个关键应用场景下的连续稀释可靠性
精准移液获得可靠结果
连续稀释通常被用于估计DNA、RNA、PCR产物、蛋白质或微生物样品的浓度。另外，这也是获得所需的试剂、化学品或化合物浓度的重要方法，例如药物学领域中的新药发现。一般而言，连续稀释往往看似轻而易举，但在手动液体处理过程中，移液速度、角度和混合上的细微差异很容易使误差在整个工作流程中不断累积，进而对最终结果的可靠性产生负面影响。不仅如此，手动移液操作较慢，大大拉长了获得结果的时间，而且长期忍受别扭的姿势、笨重的移液器、僵硬的柱塞按钮和高度重复的处理过程都可能会导致手部、肩部、颈部以及腕部的重复性劳损。
事实证明，我们的移液解决方案可以提高通量和最终结果的准确性，广泛适用于众多学科领域。得益于更快捷的多通道液体转移操作，它们缩短了需要操作者握持或保持不舒适坐姿或站姿的时长，进而降低了造成RSI的风险。除此之外，人体工程学体验始终贯穿于INTEGRA手持式电动移液器的开发，它们重量轻，枪头弹出力小，采用了直观的拇指转盘设计。使用自动化移液器完全不需要执行大量的手动液体转移步骤，减轻了手部和腕部的负担。在此，我们列举了三个关键应用，这些多功能的产品在应用中为简单、可重复的连续稀释工作流程提供了支持。
如需了解连续稀释的简单分步指南及实例、良好的移液操作以及针对特定液体的处理参数指南，请参阅以下文章：
用于精确qPCR验证和核酸定量的高效标准曲线
标准曲线（也称为校准曲线）是一种定量研究和分析工具，用于确定未知样品的浓度。标准曲线是由待测分析物或与之密切相关的化合物在目标浓度范围内制备的，并且通过分析多个已知浓度的样品来验证。然后重复该过程，对未知样品进行测定，使用标准曲线即可计算出分析物的浓度。例如，核酸定量是分子生物学实验室中常见的工作流程，当使用荧光法定量核酸时，可以通过比较标准曲线和未知样品的荧光测量值来确定DNA或RNA的含量。
详细了解如何使用荧光测定法和其他RNA和DNA定量方法来确定核酸的浓度、产量和纯度。
在构建新方案或更改工作流程时，标准曲线还被用于验证qPCR检测。使用含有已知量模板DNA的样品进行qPCR检测，并将数据与标准曲线进行比较，以评估检测的反应效率。
了解qPCR的工作原理、如何使用标准曲线验证检测以及qPCR数据分析的不同方法。
连续稀释的可重复性对于确保结果的可靠性至关重要，借助搭载单通道VIAFLO轻型电动移液器和D-ONE单通道移液模块的ASSIST PLUS移液工作站，用户可以预先设置移液速度和混合参数以保证每个稀释步骤都将在相同的条件下进行，不受操作员和批次的影响。这些移液器还可以在混合过程中进行动态体积调整，以实现最大限度的灵活性和过程优化。如果需要并行制备多条标准曲线，可以使用多通道VIAFLO移液器和VOYAGER可调枪头间距移液器，VOYAGER还可以在源容器和目标容器规格不同时直接进行连续稀释，减少液体转移步骤的数量和出现手动错误的可能性。更少的液体处理步骤也意味着可以更快地完成连续稀释，从而提高通量并缩短获得结果的时间。
可重复的连续稀释成就简单稳妥的MIC测试
抗生素耐药性可以通过病原体的随机基因突变自然形成，但药物的滥用和过度使用（尤其是医疗保健和农业中的抗生素）会显著加速这一过程。这意味着治疗许多常见感染的可选项正在迅速减少，因此为了从一开始就出具最有效的治疗方案，进行抗菌药敏试验是至关重要的。这种测试也是在药物开发过程中确定新型抗菌化合物功效的重要方法。
测量病原体对抗菌药物敏感性的方法之一是测定可抑制其生长的最低的抗菌药物浓度，即最低抑菌浓度（MIC）。这可以通过肉汤稀释法、琼脂稀释法或抗菌梯度法进行测定。点此浏览最常用MIC测定方法的全面综述。
VIAFLO 96和VIAFLO 384手持式电动移液器以及MINI 96便携式电动移液器的局部枪头装载允许用户设置预定义的移液高度和角度。这些功能消除了手动操作的影响并提高了MIC测试过程中液体处理步骤的一致性。VIAFLO 96和VIAFLO 384移液器还能让实验室具备进行更高产量的高通量连续稀释的能力。
使用ASSIST PLUS移液工作站等自动化液体处理解决方案，可以实现更复杂工作流程的高可重复性无人值守移液。该平台可简化连续稀释步骤以提高通量，并让工作人员有时间执行实验室的其他重要任务，从而提高实验室的效率。最重要的是，该移液工作站能够避免工作人员在液体转移过程中暴露于有害生物和抗生素，从而确保人员安全，同时能够消除由重复手动移液引起的RSI。
我们的应用纪要解释了ASSIST PLUS移液工作站上经过验证的自动连续稀释流程，为寻求成熟液体处理方法来简化工作流程的实验室人员提供了宝贵的资源。了解如何通过在ASSIST PLUS上自动执行2倍、5倍和10倍连续稀释的移液步骤来提高MIC测试工作流程的速度和精度。
轻而易举的细菌计数连续稀释
连续稀释也是微生物学领域的常用方法，用于估计样品中包含的细菌细胞数量。当然，当它们以高浓度存在时，是不可能对单个细菌进行计数的，因此需要对样品进行10倍连续稀释，再通过各级稀释物的铺板和孵育来估计样品的细胞生长模型。
相反，当样品中的细菌浓度非常低时，也无法通过经典的平板计数法得出可靠的活细胞数。在这种情况下，应改用最大可能性计数法（MPN）进行细菌计数。将液体肉汤等分至培养管中，并接种不同数量的样品，颜色变化则表明细菌生长，培养过程中管内液体变得浑浊或有气体产生。然后根据统计概率估计样本中活细胞的数量。
DOSE IT实验室蠕动泵可以快速准确地将肉汤和样品分配到培养管中，大大加快MPN流程的移液步骤。可选配的桌面开关或脚踏开关可提供免手动控制，通过PC软件可进行远程操作，为用户提供更高的灵活性，使其能够根据特定的MPN工作流程调整液体处理平台。DOSE IT的CUSTOMIZE模式可以基于体积、流速和重复次数等可配置参数轻松创建个性化液体处理流程，确保样品之间的可重复移液。该泵还可兼容1至8 mm内不同尺寸的管路，以满足不同的通量水平，这使其能够在MPN分析过程中准确地分配各种体积的样品。
满足需求的多功能解决方案
连续稀释是一种在许多生命科学学科中都被广泛使用的技术，而正确地执行这种技术将为后续研究的成功奠定基础。我们的液体处理解决方案可实现移液流程的标准化，并尽可能地减少手动移液时经常产生的人为错误，从而提高结果的准确性和可重复性。此外，这些创新且功能强大的产品可以大大加快连续稀释的移液过程，使实验室能够处理更多样品并缩短获得结果的时间。不仅如此，工作流程的自动化和免手动操作还可以避免实验室工作人员暴露于有害的样品材料，且不必再执行可能导致RSI的繁重移液任务，这是实验室管理人员的重要考量因素之一。我们高度灵活的仪器可以轻松适应众多不同的应用，以简化各种液体处理工作流程并提高实验室效率。
参考文献
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2214753515000169
https://bitesizebio.com/31470/obligate-qpcr-standard-curve/
https://www.jove.com/v/10507/serial-dilutions-and-plating-microbial-enumeration
https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1046/j.1469-0691.2003.00790.x