Was ist unter Genauigkeit und Präzision zu verstehen und weshalb sind sie für das Pipettieren von Bedeutung?

Bei der Genauigkeit beim Pipettieren geht es darum, wie nahe das tatsächlich dosierte Volumen an den eingestellten Wert herankommt, während die Präzision abdeckt, wie konsistent das Volumen über zahlreiche Dosierungen hin gleichbleibt. Eine gut gewartete Pipette gibt Ihnen die Sicherheit, dass Sie ein präzis arbeitendes Werkzeug verwenden, wobei die Genauigkeit einer jeden Dosierung davon abhängt, wie korrekt das Werkzeug verwendet wird, und wie erfahren die Bedienungsperson ist. Das Video befasst sich mit der Bedeutung von Genauigkeit und Präzision beim Pipettieren. Zudem hilft es Ihnen festzustellen, wo Sie in Ihren eigenen Arbeitsabläufen Schwierigkeiten haben könnten und wie einige einfache Anpassungen die Ergebnisse verbessern können.

Wann sollte ich eine manuelle oder eine elektronische Pipette verwenden?

Manuell oder elektronisch? Manuelle Pipetten können sich hervorragend zum Dosieren einzelner Proben eignen. Hingegen können die höhere Durchsatzmenge und die Serienfunktion der elektronischen Pipetten Ihren Arbeitsaufwand beim Dosieren erheblich erleichtern. Zudem bieten elektronische Pipetten auch erhöhte Präzision, denn der Kolben wird von einem Motor betrieben. Zudem sind sie eine ergonomischere Lösung, da sie eine geringere körperliche Anstrengung und weniger Aspirations- und Dispensier-Zyklen erfordern. Dieses Video hilft Ihnen, fundierter zu entscheiden, ob Sie für die einzelnen Aufgaben in Ihrem Arbeitsablauf eine manuelle oder elektronische Pipette verwenden sollten.

Soll ich über den gesamten Volumenbereich hinweg ein und dieselbe Pipette verwenden?

Wir empfehlen, stets innerhalb des Volumenbereichs von 35 bis 100 % einer jeden Pipette zu arbeiten. Der Grund dafür liegt darin, dass Genauigkeit und Präzision unter 35 % des maximalen Volumens abnehmen. Das ist aber nur die Spitze des Eisbergs! Sehen Sie sich daher das Video für weitere nützliche Informationen und Tipps zum Pipettiervolumen an.

Warum tropfen meine Spitzen?

Die Flüssigkeit in einer Pipettenspitze kann aufgrund der atmosphärischen Unterschiede zwischen der Spitze, der Flüssigkeit und dem Laborumfeld nach der Aspiration fast sofort zu verdunsten beginnen. Das kann zu einer Erhöhung des Luftdrucks innerhalb der Spitze führen, mit dem Ergebnis, dass Flüssigkeit herausgedrückt wird und abtropft. Am häufigsten tritt dieses Problem bei der Arbeit mit flüchtigen Flüssigkeiten, wie Ethanol, Azeton oder Chloroform, auf. Die Auswirkungen können dann weitreichend sein – von einer Reduzierung in Präzision und Genauigkeit des Pipettierens bis hin zu einer Kontamination des Arbeitsumfelds. Dieses Video deckt einfache Lösungen zu diesem Problem ab, so z.B. wie Sie Ihre Pipette ordnungsgemäß befeuchten und bis hin zum Ausgleichen von Luftdruck und Feuchtigkeit in der Spitze.

Wie soll ich die Pipette für ein genaueres und präziseres Pipettieren halten?

Das Handhaben einer Pipette ist eine Fertigkeit, die den meisten Forschern in Fleisch und Blut übergegangen ist, doch schlechte Gewohnheiten können Genauigkeit und Präzision reduzieren. Das wiederum kann einen Dominoeffekt auf die Ergebnisse der ganzen Linie haben.

Zum Glück ist eine Verbesserung Ihrer Pipettiertechnik etwas ganz Einfaches, das sofort durchführbar und umsetzbar ist. Haben Sie zum Beispiel gewusst, dass das Halten der Pipette möglichst im selben Winkel wichtig ist? Oder dass die Pipette bei sehr niedrigen Volumina von unter 50 μl ganz senkrecht zu halten ist? All dies, sowie Live-Vorführungen finden Sie in diesem Video.

Spielt es eine Rolle, wie tief ich meine Pipette beim Aspirieren in die Flüssigkeit eintauche?

Kurz gesagt, ja. Die Eintauchtiefe der Pipettenspitze ist ausschlaggebend, denn je tiefer sie in die Ausgangsflüssigkeit eingetaucht wird, desto größer ist die Möglichkeit, dass überschüssige Flüssigkeit außen an der Spitze haften bleibt. Das kann dazu führen, dass etwas mehr Flüssigkeit als beabsichtigt aspiriert wird, mit nachteiligen Auswirkungen auf den Arbeitsablauf und die Ergebnisse, vor allem wenn sehr geringe Volumen pipettiert werden. Idealerweise sollte die Spitze bei der Aufnahme nur zwei bis drei Millimeter in die Ausgangsflüssigkeit eingetaucht werden. Verwenden Sie dabei die Wand Ihres Ausgangsgefäßes als Hilfe beim Eintauchen. Allerdings gibt es auch Ausnahmen. Sehen Sie sich das Video an, um mehr darüber zu erfahren.

Nach dem Dosieren ist ein Tropfen auf der Spitze zurückgeblieben. Was soll ich damit tun?

Nach dem Dosieren könnte noch ein Tropfen Flüssigkeit am Spitzenende anhaften. Dies ist ein Teil des flüssigen Zielvolumens, der zur bereits dosierten Flüssigkeit hinzugerechnet werden muss. Dieser muss abgestreift werden. Hierfür gibt drei Wege, dies auszuführen. Sehen Sie sich das Video an und erfahren Sie, welche der Optionen Sie für Ihre Anwendung verwenden sollten.

Wie soll ich stark viskose Flüssigkeiten pipettieren?

Das kann einer der erheblichsten Schmerzpunkte beim Pipettieren in biowissenschaftlichen Labors sein. Erstens muss mit geringerer Geschwindigkeit pipettiert werden. Zudem muss vor dem Beenden einer jeden Aspiration oder Dispensierung pausiert werden. Außerdem ist es vernünftig, beim Pipettieren eine Revers-Methode anzuwenden, d.h. mehr Flüssigkeit als erfordert zu aspirieren, die erwünschte Menge zu dosieren und die dabei verbliebene geringe Menge als Abfall zu entsorgen.

Wie soll ich volatile Flüssigkeiten pipettieren?

Auch beim Pipettieren volatiler Flüssigkeiten werden Sie Ihre Methode etwas ändern müssen, wenn Sie ein Unterdosieren vermeiden wollen. Der Grund dafür liegt darin, dass flüchtige Flüssigkeiten viel schneller verdunsten, was zu tropfenden Spitzen und einem Flüssigkeitsverlust zwischen Aufnahme und Abgabe führen kann. Am besten verhindern Sie dies, indem Sie die Spitze mit der Flüssigkeit, die Sie pipettieren wollen, befeuchten. Damit werden Luftdruck und Feuchtigkeit in der Spitze ausgeglichen. Es ist auch von Vorteil, nach der Aspiration schneller als üblich zu pipettieren und Ihre Flüssigkeit damit so schnell wie möglich in das Zielgefäß zu bringen. Zudem kann auch ein Reverses Pipettieren helfen. Allerdings gibt es einige Ausnahmen zu diesen Regeln, weshalb Sie das Video für weitere Infos ansehen sollten!

Was kann ich tun, um bei Mehrfachabgaben mit einer elektronischen Pipette meine Genauigkeit und Präzision zu erhöhen?

Sie sollten bei der Mehrfachabgabe stets die erste und letzte Aliquote aussondern. Der Grund dafür liegt darin, dass sich der Mechanismus in der Pipette von der Aufnahme- auf die Abgabe umstellen muss, was sich möglicherweise auf die Genauigkeit der ersten Dosierung auswirken kann. Gleichermaßen ist die letzte Aliquote eine Anhäufung aller Dosierfehler in Bezug auf die Genauigkeit der anderen Aliquoten und kann daher vom Zielvolumen abweichen. All dies wird in diesem Video mit entsprechenden Demonstrationen behandelt.

Wie kann ich sicherstellen, dass meine Pipette so perfekt und so lang wie möglich funktioniert?

Regelmäßiges Warten ist letztendlich entscheidend, wenn Sie ein höchstes Maß an Genauigkeit und Präzision während der Lebensdauer Ihrer Pipette gewährleisten wollen. Wichtig ist auch die korrekte Aufbewahrung der Pipette bei Nichtbenutzung, verbunden mit regelmäßiger Reinigung, Dichtheitsprüfung und Kalibrierung. Dieses Video ist eine praktische Anleitung zu all diesen Punkten.

War dies ein hilfreicher Artikel für Sie? Sind Sie mit einigen der Herausforderungen schon vertraut? Laden Sie ein Poster mit diesen Tipps und Tricks für Ihr Labor herunter!

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Weiterführende Informationen:

• eBook: The ultimate guide to stress-free pipetting